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昆山舒美红萝卜樱黄酮提取及其生物活性研究

[导读]利用超声波协同酶法提取红萝卜樱中的黄酮。采用响应面法对红萝卜樱黄酮提取工艺进行优化,以料液比、微波功率和提取时间作为自变量,以黄酮的提取量为响应值, 昆山超声仪器有限公司研究各因素和其交互作用对红萝卜樱黄酮提取量的影响,确定超声波协同酶法提取红萝卜樱中的黄酮的最佳工艺条件。

试验材料与方法

红萝卜樱 (市售)  健康雄性昆明品系小鼠  芦丁标准品、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、无水乙醇、二甲苯, 以上试剂均为分析纯, 生理盐水 (NaCl分析纯)   金黄色葡萄球菌、青霉菌

分光光度计,电子天平 (BSA124S-CW) , 超声波清洗机 KQ-300DBKQ-500DE, 昆山超声仪器公司;离心机 (TDL-5) , 万能粉碎机 (FLB-200A) , 恒温干燥箱 (DHG-9240A) , 。

单因素试验红萝卜樱黄酮提取的过程中, 会有许多因素影响提取率。主要是:超声功率、超声时间、酶解温度、酶使用量、乙醇浓度。为研究红萝卜樱总黄酮提取工艺条件, 首先通过单因素试验确定最适条件, 然后通过响应面试验设计确定最佳提取条件。

1. 超声功率对提取率的影响称取红萝卜樱粉末5份, 每份3.00g, 按料液比1∶20的比例分别加入浓度为60%乙醇溶液, 加入0.015g纤维素酶, 然后置于超声波清洗机中, 分别以300W、350W、400W、450W、500W的超声功率, 以40℃的温度, 超声提取30min, 真空抽滤, 离心, 得黄酮粗提取液, 稀释、定容后, 在λmax=510nm测量其吸光度, 重复三次该试验, 取平均值。

2. 超声时间对提取率的影响称取红萝卜樱粉末5份, 每份3.00g, 按料液比1∶20的比例加入浓度为60%乙醇溶液, 加入0.015g纤维素酶, 然后置于超声波清洗机中, 以40℃的温度、400W功率, 分别超声辅助提取10min、15min、20min、25min、30min, 真空抽滤, 离心, 得黄酮粗提取液, 稀释、定容后, 在λmax=510nm测量其吸光度, 重复三次该试验, 取平均值。

3. 酶解温度对提取率的影响称取红萝卜樱粉末5份, 每份3.00g, 以料液比1∶20的比例加入0.015g纤维素酶, 加入60%乙醇溶液, 然后置于超声波清洗机中, 分别以43℃、46℃、49℃、52℃、55℃的温度、400W功率, 超声辅助提取30min, 真空抽滤, 离心, 得黄酮粗提取液, 稀释、定容后, 在λmax=510nm测量其吸光度, 重复三次该试验, 取平均值。

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